【出 处】：

【作 者】：

【摘 要】通过易错PCR方法建立了一个鼠肺不同长度的nGLP-1R（从第21个氨基酸开始到第145个氨基酸）的噬菌体随机突变展示肽库，通过噬菌体表面展示技术检测胰高血糖素样肽1受体N端片段（nGLP-1R）在缺失一段或两段基因后是否还具有结合Exendin-4的活性。经ELISA分析发现了一株无结合活性的突变株，命名为EP16。经测序比对，发现EP16缺失了前20个和后10个氨基酸，且第52位色氨酸突变为精氨酸。为确定EP16与Exendin-4无结合活性的原因，重新构建了无前20个和后10个氨基酸的EP16野生型及第52位色氨酸变为精氨酸的全长nGLP-1RWS2R强与EP16进行对比分析。结果表明，EP16的活性丧失是由保守的第52位色氨酸突变为精氨酸引起的，缺失的前20个和后10个氨基酸没有影响其生物学活性。关键位点单个氨基酸残基的突变可以改变胰高血糖素样肽1受体N端片段整个蛋白质的生物学活性。