【出 处】：

【作 者】：

【摘 要】将标记有荧光探针FITC（异硫氰基荧光素）的脂肪酶固定化，通过测定活性和荧光光谱，探究各种因素对固定化后荧光标记脂肪酶性质的影响，并分析活性、构象和荧光光谱三者之间的联系。研究结果表明：在固定化脂肪酶过程中，聚乙二醇400二丙烯酸酯能形成合理的网格结构，使酶活较高；配体诱导酶的催化构象，使酶活性提高到未诱导酶的2倍以上；配体抽提能使脂肪酶活性中心得到释放从而提高催化活力。固定化脂肪酶的稳定性大大提高，在90℃、强酸强碱下固定化酶仍保有原酶70％、60％以上的活性；用盐酸胍、脲等溶解变性剂浸泡15d后，酶活性仍然可以保持初始活性的70％以上。荧光光谱能较好地反映脂肪酶的活性和构象变化，最适pH和温度下脂肪酶的荧光强度最低，在溶解变性剂中，荧光强度随时间延长而逐渐降低，这表明不同条件下脂肪酶构象经历的去折叠过程不同。