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【摘 要】采用PCR扩增乳酸乳球菌（Lactococcus lactis）MB191菌株的全长肽聚糖水解酶基因acmA，通过c．末端融合构建了与绿色荧光基因gfp的融合基因acmA—gfp，再连接于表达载体pMG36k上后得到可组成型表达AcmA—GFP融合蛋白的重组质粒pMB137，然后将该质粒电转化导入到乳酸乳球菌AS1．2829中获得重组菌MB137。经SDS—PAGE检测，重组菌MB137可表达预期的分子量约74kD的蛋白质。Western blotting、细胞分级分离组分的荧光活性测定和特异GFP二抗标记的流式细胞仪检测证实GFP被成功锚定在重组菌细胞表面，被锚定蛋白约占总表达融合蛋白的35％。进一步通过从枯草芽胞杆菌BF7658基因组中扩增去信号肽序列的B-1，3-1，4葡聚糖酶基因g／s，来取代pMB137中的gYp，得到携带融合基因acmA—gls的重组质粒pMB138，经导入到乳酸乳球菌AS1．2829后得到重组菌MB138，其全细胞B，1，3-1，4-葡聚糖水解酶的活性约为12U／mL菌液，明显高于对照菌株。